Standard methods for Nosema research

Methods are described for working with Nosema apis and Nosema ceranae in the field and in the laboratory. For fieldwork, different sampling methods are described to determine colony level infections at a given point in time, but also for following the temporal infection dynamics. Suggestions are made for how to standardise field trials for evaluating treatments and disease impact. The laboratory methods described include different means for determining colony level and individual bee infection levels and methods for species determination, including light microscopy, electron microscopy, and molecular methods (PCR). Suggestions are made for how to standardise cage trials, and different inoculation methods for infecting bees are described, including control methods for spore viability. A cell culture system for in vitro rearing of Nosema spp. is described. Finally, how to conduct different types of experiments are described, including infectious dose, dose effects, course of infection and longevity tests

Rhizoctonia crown and root rot of the pasture legume, sulla (Hedysarum coronarium)

Rhizoctonia solani AG-2-2 was isolated from wilting and dying plants of sulla (Hedysarum coronarium), which is currently being assessed in eastern and southern Australia for its potential as a pasture and forage legume. Infected plants in the field had extensive rotting of the taproot, lateral roots and crown. Koch's postulates were fulfilled using three inoculation methods. The disease may pose a considerable threat to the potential use of H. coronarium in the dryland, grazing farming systems of Australia, with resistance offering the most viable option for minimising its impact.

Beneficial microbial inoculants for agriculturally important crops

Survey of rhizobium inoculation methods used in chickpeas of the northern grains region with aim to adopt technologies for future microbial inoculants.

Infection by Alternaria alternata causes discolouration of Backhousia myrtifolia foliage and flowers.

The pathogenicity of three isolates of Alternaria alternata from Backhousia myrtifolia leaves was characterised and compared. Isolate BRIP 52222 was virulent compared to isolates BRIP 52223 and BRIP 52221. A comparison of inoculation methods showed that abrasion was more effective at establishing an infection than puncture wounding. Koch's postulates were assessed to confirm the pathogenicity of A. alternata on B. myrtifolia foliage and floral tissues using a conidial suspension of the most virulent isolate. Sporulation was triggered by incubating A. alternata (BRIP 52222) at 28 degrees C for 10 d under alternating 12 h black-light/12 h dark conditions on half-strength potato dextrose agar (PDA). In contrast, incubation of A. alternata under continuous black-light on either half- or full-strength PDA did not yield conidia. Host symptoms caused by inoculation with the pathogen included a brown-black discolouration of both foliage and floral tissues. Microscopic examination of cellular structures suggested that perturbation of oil glands may contribute to the tissue discolouration in B. myrtifolia caused by A. alternata infection. Oil gland structures can be disrupted during an active A. alternata infection, causing the leakage of essential oil followed by discolouration.

Tratamento com fungicidas, aplicacao de micronutrientes e inoculacao de sementes de soja.

1997

Métodos quantitativos para determinação de características bioquímicas e fisiológicas associadas com bactérias promotoras do crescimento vegetal.

Metodologia para as análises em laboratório; Produção de sideróforos; Produção de ácido indol acético (AIA); Produção de citocininas e giberelinas; Fixação assimbiotica de N2; Produção de quitinase; Producao de B-1,3-glucanase; Produção de 1-aminociclopropano-1-carboxylato deaminase; Produção de ácido cianidrico; Solubilizacao de fosfatos; Produção de pectinase; Produção de celulase; Antagonismo direto a fungos; Antagonismo indireto a fungos (compostos volateis); Antagonismo entre bacterias.

Estabelecimento de estirpes de Bradyrhizobium japonicum/ B.elkanii e seus efeitos na reinoculacao da soja em solos de cerrado.

Neste trabalho sao apresentados os resultados de um estudo para avaliar o estabelecimento de estirpes de Bradyrhizobium japonicum / B. elkanii, na resposta da soja a reinoculacao em solos de Cerrado. O experimento, que teve duracao de seis anos, foi iniciado em 1994 num Latossolo Vermelho de primeiro cultivo, isento de populacoes de rizobio capazes de nodular a soja. O delineamento experimental foi o de blocos ao acaso com tres repeticoes e a cultivar de soja utilizada foi a Doko RC. A ocupacao dos nodulos foi avaliada por tecnicas de imuno-aglutinacao. No primeiro ano do experimento (safra 1993/1994), as estirpes CPAC 7, CPAC 15, 29W e SEMIA 587 (sorogrupos CB1809, SEMIA 566, 29W e SEMIA 587, respectivamente) foram introduzidas no solo por meio da inoculacao das sementes da soja Doko RC. Tambem foi incluido um tratamento sem inoculacao, com as parcelas cultivadas com arroz. No ano seguinte (safra 1994/1995), as parcelas foram subdivididas em tres subparcelas, e a soja foi cultivada sob tres tratamentos: a) CPAC 7, b) CPAC 15 e c) sem inoculacao. No terceiro ano (safra 1995/1996), todo o experimento recebeu a soja inoculada com a estirpe CPAC 7. No quarto e no quinto anos de conducao do experimento (safras 1997/1998 e 1998/1999), a soja foi cultivada sem inoculacao. No ano agricola 1996/1997 a area foi deixada em repouso. Para os tratamentos com inoculacao foram utilizados inoculantes turfosos (8,0 x 108 celulas/g) na proporcao de 1 kg de inoculante por 50 kg de sementes. As estirpes introduzidas no solo no primeiro ano influenciaram a ocorrencia da estirpe CPAC 7 nos nodulos obtidos no terceiro ano de conducao do experimento. Nos tratamentos onde a CPAC 7 foi introduzida no primeiro ano, sua ocorrencia nos nodulos foi, em media, de 70%, enquanto nos outros tratamentos variou entre 25% e 44%. No quarto e quinto anos, quando a soja foi cultivada sem inoculacao, estirpes do sorogrupo SEMIA 566 predominaram na nodulacao (mais de 44% dos nodulos). No quinto ano do experimento, mesmo nos tratamentos onde essa estirpe jamais foi inoculada, a ocorrencia do sorogrupo SEMIA 566 foi de 74% dos nodulos, evidenciando sua elevada capacidade competitiva. Futuras estrategias para reinoculacao da soja em solos de Cerrado com as estirpes CPAC 7 e CPAC 15 deverao levar as observacoes desse estudo em consideracao.

Anais...

Estatuto Social. Programação. Resumos: Roadmapping da comercialização de inoculantes no Brasil: novas estratégias, articulações e demandas da ANPII. Evaluación de la sobrevida bacteriana en un pre-inoculante para soja. Utilização de um inoculante padrão como referência para a determinação de qualidade de produtos comerciais. Comparação e adequação de metodologias para controle de qualidade de inoculantes comerciais para leguminosas. Avaliação da produtividade da cultura do milho com diferentes doses de fósforo e inoculação com Penicillium bilaiae. Testes de eficiência agronômica da tecnologia de co-inoculação de rizóbios e azospirillum em soja e feijoeiro. Eficiência simbiótica de estirpes isoladas de áreas cultivadas com soja em Roraima. Interação entre cultivares de arroz irrigado com bactérias diazotrófricas associativas. A construção de uma rede de promoção do benefício da FBN através dos inoculantes: uma proposta metodológica em busca de uma Agricultura de Baixo Carbono. Efeitos da fertilização nas características de promoção de crescimento vegetal: direcionando a prospecção de inoculantes. Potencial de expansão da FBN para a produção de grãos no Brasil pela agricultura familiar. Promoção do crescimento inicial do milho estimulado por Bacillus sp. Validação e demandas de estirpes de rizóbio para a inoculação de espécies arbóreas, adubos verdes e forrageiras visando metas do programa ABC e novo código florestal. Tecnologia de bioprocessos aplicada ao desenvolvimento de inoculantes e novos insumos biológicos. A construção de uma rede de promoção do benefício da FBN através dos inoculantes: uma proposta metodológica em busca de uma Agricultura de Baixo Carbono. A pesquisa em Fixação Biológica do Nitrogênio na Embrapa Soja: passado, presente e perspectivas futuras. Embrapa Cerrados: 37 anos de contribuições para o avanço da FBN no Brasil. Especificidade de rizóbios em ervilha. Ata técnica da assembleia geral ordinária da XVI RELARE. Ata da eleição da diretoria da RELARE para o biênio 2012-2014. Relação de participantes da XVI RELARE.

Comparative effect of root-knot nematode on severity of Verticillium and Fusarium wilt in cotton

The effect of root-knot nematode (RKN) (Meloidogyne incognita) on Verticillium dahliae and Fusarium oxysporum f.sp. vasinfectum in cotton (Gossypium hirsutum) was investigated. Two different inoculation methods were used, one in which inoculum was added to the soil, so that nematode and fungal inoculum were in close proximity; the other, inoculation into the stem, whereby the two inocula were spatially separated. Invasion of the roots by RKN enhanced disease severity, as measured by the height of vascular browning in the stem, following inoculation with either wilt pathogen. The effect of RKN on Fusarium wilt was more pronounced than that on Verticillium wilt. Nematode-enhanced infection by F. oxysporum is a well known effect but there are few reports of enhanced infection by Verticillium due to RKN. Relative resistance of a number of cotton cultivars to both wilt diseases, as measured by height of vascular browning, was similar to the known field performance of the cultivars. The use of vascular browning as an estimate of disease severity was therefore validated.

Avaliação de métodos de inoculação de Phytophthora parasitica em plântulas e plantas jovens de citros

Este trabalho teve como objetivo avaliar métodos de inoculação de Phytophthoraparasitica em plântulas e plantas jovens de citros (Citrus spp.) visando sua utilização em estudos de resistência de porta-enxertos à gomose de Phytophthora. Os métodos de inoculação testados foram: contato planta sem ferimento-patógeno, casca destacada, inserção de disco de meio de cultura contendo micélio sob a casca, método do disco e inserção de agulha e palito infestados em plântulas e plantas jovens de citros. A resistência de genótipos à gomose pode ser avaliada em plântulas in vitro, através de inserção de agulha infestada. O método do disco e o da inserção sob casca foram os melhores quando utilizados em plantas jovens. A medida da área total da lesão é a variável ideal para avaliação da doença. No entanto, o comprimento da lesão pode ser utilizado na avaliação da doença em plântulas, plantas jovens e no campo.

Contribuição de fungos micorrízicos arbusculares autóctones no crescimento de Guazuma ulmifolia em solo de cerrado degradado

Ensaios foram conduzidos, em casa de vegetação, com solos de pastagem degradada reflorestada e cerrado preservado (controle) visando avaliar a contribuição de fungos micorrízicos arbusculares (FMA) autóctones no crescimento de mutambo (Guazuma ulmifolia Lamb.). As mudas foram transplantadas para sacos de plástico (2 kg) com substratos esterilizados na proporção 4:1 (solo:areia), e o tratamento inoculado recebeu 300 esporos de FMA por saco. A inoculação não proporcionou aumento significativo na produção da matéria seca da parte aérea, matéria fresca das raízes e altura da planta, sugerindo que a G. ulmifolia não é responsiva à micorrização.

Reação de cultivares de soja a isolado de Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens, proveniente de feijoeiro

O objetivo deste trabalho foi avaliar a reação das cultivares de soja Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (EMBRAPA) 46, Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (EMBRAPA) 47, Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (EMBRAPA) 48, Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (EMBRAPA) 58, Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (EMBRAPA) 59, Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (EMBRAPA) 60, Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (EMBRAPA) 61, Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (EMBRAPA) 62, BRS 66, BRS 132, BRS 133, BRS 134, BRS 135, BRS 136, BRS 155, BRS 156, BRS 157, IAC/BR-21, MG/BR-46 (Conquista) e MG/BR-48 (Garimpo RCH) a um isolado de Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens, proveniente de feijoeiro, usando dois métodos de inoculação, em casa de vegetação. Foram observados baixos níveis de severidade da doença nas cultivares de soja, independentemente do método de inoculação utilizado.

Metodologias para determinação da reação de cultivares de soja à Fusarium tucumaniae

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Caracterização de Rhizoctonia solani Kühn, agente causal da mela da soja (Glycine max (L.) Merrill), seleção de genótipos e controle químico

Pós-graduação em Agronomia (Proteção de Plantas) - FCA

Avaliação de métodos de inoculação de Phytophthora parasitica e mapeamento de QTLs de resistência em híbridos de Citrus sunki vs. Poncirus trifoliata a gomose

Pós-graduação em Agronomia (Proteção de Plantas) - FCA